Seroprevalencia de infecciones hemotransmisibles en donantes de sangre / Seroprevalence of transmissible infections in blood donors

Introducción. La seguridad transfusional es el objetivo primordial de los bancos de sangre, sin embargo, conlleva un alto riesgo de eventos adversos como son las infecciones transmisibles por transfusión (ITT). El conocimiento de la prevalencia de estas infecciones fue de particular interés en esta investigación, donde se determinó su frecuencia, coinfección y relación con el tipo de donantes admitidos. Metodología. Estudio observacional retrospectivo de 2017 y 2018, en el que se incluyeron todos los registros de donantes de sangre que contenían datos demográficos y resultados de los marcadores obligatorios en el país (Ecuador), tanto de pruebas serológicas como moleculares. Se obtuvo el permiso del custodio de la información y del subcomité de bioética de investigaciones en seres humanos. Para el análisis de los datos se utilizó estadística descriptiva e inferencial. Resultados. Se determinó una prevalencia del 3,18 % de resultados reactivos para una o más ITT, el rango de edad más prevalente fue de 29 a 40 años, el 89,8 % fueron donantes compensatorios, y de ellos el 90 % fueron reactivos para una o más ITT. El marcador serológico más prevalente fue el anti-core del virus de la hepatitis B (anti-HBc), seguido por el de sífilis y los anticuerpos contra el virus de la hepatitis C (VHC). La coinfección más prevalente fue con sífilis y hepatitis B. Se encontró una diferencia estadísticamente significativa entre los resultados obtenidos en las pruebas serológicas y las moleculares (x2=26,9; p=0,000). Conclusión. Las ITT en los bancos de sangre son un riesgo latente, por lo que es necesario conocer las variaciones epidemiológicas que existen en cada población. El conocimiento de la prevalencia de las ITT en donantes de sangre permite establecer nuevas estrategias de selección del donante, que garanticen la mejor seguridad posible en las transfusiones, además debe verificarse siempre la metodología utilizada y hacer monitoreo permanente del sistema de calidad establecido

Introduction. Transfusion safety is the primary objective of blood banks, however one of the adverse reactions to blood transfusion are the transfusion transmissible infections (TTIs). Knowledge of the prevalence of these infections was of particular interest in this study where we determined their frequency, co-infection and relationship with the type of donors admitted. Methodology. Retrospective observational study during 2017 and 2018, in which all blood donor records containing demographic data and results of the country's (Ecuador) mandatory serological markers of both serological and molecular tests were included. Permission was obtained from the data custodian and the Human Research Bioethics Subcommittee. Descriptive and inferential statistics were used for data analysis. Results. A prevalence of 3,18% of reactive results to one or more TTIs was determined, the most prevalent age range was 29 to 40 years, 89.8% were compensatory donors and 90% of them were reactive to one or more TTIs. The anti- core serological marker of the hepatitis B virus (anti-HBc) was the most prevalent, followed by syphilis and hepatitis C antibodies. Syphilis and hepatitis B were identified as the most prevalent coinfection. The correlation between the results obtained in the serological and molecular tests was determined to be different and statistically significant (x2=26.9; p=0.000). Conclusion. TTIs in blood banks are a latent risk, so it is necessary to know the epidemiological variations that exist in every population. Knowledge of the prevalence of TTIs in blood donors facilitates new donor selection strategies that guarantee the best possible safety in transfusions. In addition, the methodology used must always be verified and the established quality system must be permanently monitored

Estudio de la relación entre el grupo sanguíneo eritrocitario ABO con los niveles del factor von Willebrand en pacientes diagnosticados con la enfermedad / Study of the relationship between the ABO erythrocyte blood group with the von Willebrand factor levels in patients diagnosed with the disease

Resumen La presencia o ausencia de los antígenos del sistema ABO entre otros factores se han relacionado con los niveles plasmáticos del factor von Willebrand (VWF) debido a su influencia en la proteólisis por la ADAMTS 13; la actividad de este sistema eritrocitario puede incidir en eventos trombóticos o hemorrágicos. El propósito de este estudio fue determinar si los pacientes diagnosticados con la enfermedad de von Willebrand pertenecían al grupo sanguíneo O y si los niveles de VWF y FVIII eran más bajos que los de los grupos no-O. El grupo sanguíneo fue identificado por un método directo en tubo y el VWF y FVIII se midieron mediante ensayos de coagulación. Se analizó un total de 64 pacientes, el 29,4% eran mayores de 40 años, el 100% presentaron valores más bajos del VWF que los grupos no-O, el 64% de los pacientes presentaron una concentración del FVIII de 6-49% inferior al rango normal establecido y el 78,51% fueron tipificados como del grupo sanguíneo O. El análisis estadístico demostró una relación estadísticamente significativa entre los niveles de VWF y el grupo sanguíneo. Se determinó que existe una relación entre el sistema ABO y el VWF-FVIII (p<0,05); sin embargo, esto no significa que sea la única causa de la existencia de un nivel bajo del factor. Estos datos indican la necesidad de mayores estudios en la población de pacientes con la enfermedad y la necesidad de determinar los tipos de von Willebrand y su relación con el grupo sanguíneo.

Abstract The presence or absence of antigens of the ABO system, among other factors, have been related to plasma levels of von Willebrand factor (VWF) due to its influence on proteolysis by ADAMTS 13. The activity of this erythrocyte system may influence on thrombotic or hemorrhagic events. The purpose of this study was to determine if the patients diagnosed with von Willebrand disease belonged to the O blood group and the VWF and FVIII levels were lower than those of the other blood groups. The blood group was identified by direct tube method and the VWF and FVIII were measured by coagulation tests. A total of 64 patients were analised, 29.4% were older than 40, 100% presented lower values of VWF than the non-O groups. A total of 64% of the patients presented a lower concentration of 6-49% in FVIII at the established normal range and 78.51% were typified as blood group O. Statistical analysis showed a statistically significant relationship between VWF levels and blood group. It was determined that there is a relationship between the ABO system and the VWF-FVIII (p<0.05). However, this does not mean that is the only cause of the existence of a low level of these factors. These data indicate the need for further studies in the population of patients with von Willebrand disease in order to determine the von Willebrand types and their relationship with the blood group.

Resumo A presença ou ausência dos antígenos do sistema ABO, entre outros fatores, tem sido relacionada aos níveis plasmáticos do fator de von Willebrand (VWF) devido à sua influência na proteólise pelo ADAMTS 13; a atividade desse sistema eritrocitário pode afetar eventos trombóticos ou hemorrágicos. O objetivo deste estudo foi determinar se os pacientes com diagnóstico de doença de von Willebrand pertenciam ao grupo sanguíneo O e se os níveis de VWF e FVIII eram inferiores aos dos grupos não-0. O grupo sanguíneo foi identificado por um método direto em tubo e o VWF e o FVIII foram medidos por testes de coagulação. Foram analisados 64 pacientes, 29,4% tinham idade superior a 40 anos, 100% apresentaram valores mais baixos do VWF que os grupos não-O e 64% dos pacientes apresentaram concentração de FVIII 6-49% menor à faixa normal estabelecida, e 78,51% foram tipificados como do grupo sanguíneo O. A análise estatística mostrou uma relação estatisticamente significativa entre os níveis de VWF e o grupo sanguíneo. Foi determinado que existe uma relação entre o sistema ABO e o VWF-FVIII (p<0,05), no entanto, isso não significa que seja a única causa da existência de um baixo nível do fator. Esses dados indicam a necessidade de novos estudos na população de pacientes com a doença e a necessidade de determinar os tipos de von Willebrand e sua relação com o grupo sanguíneo.

Significación de los marcadores infecciosos para identificar portadores de hepatitis B en donantes de sangre / Significance of hepatitis B surface antigen, IgM/IgG core antibody and hepatitis B virus DNA in blood donors

Resumen Introducción: La identificación de portadores del virus de la hepatitis B en donantes de sangre es imperativo para evitar la transmisión de la enfermedad a través de transfusiones sanguíneas. Objetivo: Determinar si los donantes de sangre con resultados positivos de los marcadores serológicos HbsAg y anti-HBc eran portadores de ADN del virus de la hepatitis B. Métodos: Se recolectaron 12 745 muestras de seis bancos de sangre ecuatorianos, las cuales fueron analizadas con pruebas serológicas para identificar los marcadores infecciosos HBsAg, anti-HBc, anti-HBs mediante prueba ELISA automatizada. Todas las muestras positivas para uno, dos o los tres marcadores fueron analizadas con técnica molecular para determinar la presencia de ADN viral. Resultados: Se identificó que 27.5 % de las muestras reactivas solo a anti-HBc y 100 % de las muestras con resultados positivos de HBsAg/anti-HBc-IgM/IgG presentaron ADN del virus de la hepatitis B (p = 0.001). Conclusiones: La elección de los marcadores de infección y los métodos de detección definen los resultados. Es importante la realización de dos pruebas serológicas y una molecular para identificar a los portadores del virus de la hepatitis B y evitar su transmisión.

Abstract Introduction: Identification of hepatitis B virus carriers in blood donors is imperative in order to avoid transmission of the disease via blood transfusion. Objective: To determine if blood donors with positive results for serological markers HBsAg and anti-HBc were hepatitis B virus DNA carriers. Methods: 12,745 samples were collected from six Ecuadorian blood banks and analyzed for HBsAg, anti-HBc and anti-HBs infectious markers by automated ELISA. All samples that tested positive for one, two or all three markers were analyzed with molecular techniques to determine the presence of viral DNA. Results: 27.5 % of the samples that were reactive for anti-HBc alone and 100 % of those with positive results for HbsAg and IgM/IgG anti-HBc were identified to contain hepatitis B virus DNA (p = 0.001). Conclusions: The selection of infection markers, as well as the detection methods define the results. Performing two serological and one molecular test is important in order to identify hepatitis B virus carriers and prevent its transmission.

Determinación de la viabilidad de los concentrados plaquetarios obtenidos de capa leucocitaria (buffy coat) durante siete días de almacenamiento / Monitoring of the Viability of Platelet Concentrates Obtained from Buffy Coat during Seven Days of Storage / Determinação da viabilidade de concentrados de plaquetas obtidos de camada leucocitária (buffy coat) durante sete dias de armazenamento

Introducción: los concentrados plaquetarios (CPG) son hemocomponentes lábiles afectados por varios factores, desde el método de obtención hasta las condiciones de almacenamiento, que provocan una paulatina pérdida de funcionalidad, por lo que es necesario evaluar parámetros de calidad que garanticen la viabilidad de las plaquetas durante los días de almacenamiento, con el propósito de monitorear el mantenimiento de las características funcionales de las plaquetas. Materiales y métodos: estudio descriptivo transversal, con un tamaño muestral de 64 cpq, evaluados a los 3, 5 y 7 días de almacenamiento. Los parámetros monitoreados fueron físicos, de almacenamiento y porcentaje de la activación plaquetaria mediante la medición de P-selectina (cd62) por citometría de flujo. Se aplicó el estadístico de chi cuadrado, Anova de un factor, Kruskall-Wallis y correlación de Pearson. Resultados: existen diferencias significativas al séptimo día con relación al tercer y quinto día de almacenamiento, especialmente en el parámetro de formación de remolino plaquetario o swirling (p < 0.005) y agregados plaquetarios (p = 0.001). La activación plaquetaria aumentó significativamente (p = 0.001) desde el quinto día. Conclusiones: la viabilidad de los cpq difiere con los días de almacenamiento, por lo que es necesario evaluar pH, formación de remo-linos y agregados a todos los cpq antes de ser transfundidos como indicativos de activación plaquetaria y disminución de su funcionalidad

Introduction: Platelet concentrates (cpq) are labile blood components affected by several factors from the method of production to storage conditions that cause a gradual loss of functionality. For this reason, it is necessary to evaluate the platelet quality parameters that guarantee the viability during the storage days, with the purpose of monitoring the maintenance of the functional characteristics of the platelets. Materials and methods: This cross-sectional descriptive study had a sample size of 64 platelet concen-trates, evaluated at 3, 5, and 7 days of storage. The monitored parameters were the physical storage parameters and percentage of platelet activation by measuring P-selectin (cd62) via flow cytometry. The chi-square statistic, one-way Anova, Kruskal­Wallis test, and Pearson correlation were applied. Results: Significant differences were observed on the 7th day in relation to the 3rd and 5th day of storage, espe-cially in the swirling parameter (p < 0.005) and platelet aggregates (p = 0.001). The platelet activation increased significantly (p = 0.001) on the 5th day. Conclusions: Based on the findings of this study, the viability of the platelet concentrates differs with the days of storage. For this reason, it is necessary to evaluate the swirling, pH, and aggregates to all platelet concentrates before being transfused as an indication of platelet activation and decreased functionality

Introdução: os concentrados de plaquetas (cpq) são hemocomponentes lábeis afetados por diversos fato-res, desde o método de obtenção até as condições de armazenamento que ocasionam uma perda grada-tiva de funcionalidade, sendo necessário avaliar os parâmetros de qualidade que garantem a viabilidade das plaquetas ao longo dos dias de armazenamento, a fim de monitorar a manutenção das características funcionais das plaquetas. Materiais e métodos: estudo descritivo transversal, com tamanho de amostra de 64 cpq, avaliados aos três, cinco e sete dias de armazenamento. Os parâmetros monitorados foram físicos, de armazenamento e porcentagem de ativação plaquetária pela dosagem de P-selectin (cd62) por citometria de fluxo. Os testes estatísticos aplicados incluíram o teste qui-quadrado, anovade um fator, teste de Kruskall-Wallis e correlação de Pearson. Resultados: há diferenças significativas no sétimo dia em relação ao terceiro e quinto dia de armazenamento, principalmente no parâmetro formação de rede-moinhos ou swirling de plaquetas (p < 0.005) e agregados plaquetários (p = 0.001). A ativação plaquetária aumentou significativamente (p = 0.001) a partir do quinto dia. Conclusões: a viabilidade dos concentra-dos de plaquetas difere com os dias de armazenamento, por isso é necessário avaliar o pH, a formação de redemoinhos e agregados a todos os concentrados de plaquetas antes de serem transfundidos como indicativo de ativação plaquetária e diminuição de sua funcionalidade

Titulación de hemolisinas en concentrados plaquetarios obtenidos a partir de buffy coat de donantes voluntarios de sangre de grupo O Rh D positivo / Hemolysin titration in platelet concentrates obtained from buffy coat of voluntary blood donors of group O Rh D positive

Los posibles efectos adversos que se producen en transfusiones incompatibles ABO son un riesgo latente en el uso de concentrados de plaquetas grupo O, por lo que la titulación de hemolisinas anti-A/B constituye una de las estrategias para su prevención. El objetivo de este estudio fue determinar la frecuencia de títulos de hemolisinas de isotipos IgG e IgM anti-A/B en donantes de sangre. Se trató de un estudio descriptivo, transversal y aleatorio simple con un tamaño muestral de 308 muestras. Se aplicó la metodología en tubo, gel salino y anti-inmunoglobulina IgG y, mediante soluciones seriadas, se evidenció el título. Adicionalmente, se realizó una encuesta sobre los posibles factores de riesgo para el aumento de estos títulos. Se aplicó estadística descriptiva mediante el uso del software informático SPSS versión 22.0 y la relación entre variables independientes a través del análisis estadístico de Chi-cuadrado y, para establecer la concordancia de las lecturas visuales de las tarjetas de gel, se aplicó el índice kappa. Se determinó la existencia de hemolisinas de isotipo IgG e IgM anti-A/B de títulos superiores a 1/64. Existió una relación estadísticamente significativa entre embarazos y títulos de IgG anti-A/B >1/128 y el aumento de hemolisinas de isotipo IgM y la ingesta de probióticos. Los resultados demostraron la necesidad de implementar la titulación de hemolisinas previo a la transfusión de concentrados plaquetarios no isogrupo, por lo que se recomienda una investigación de riesgo-beneficio y el seguimiento de pacientes con transfusiones de concentrados plaquetarios incompatibles ABO.

The possible adverse effects that occur in incompatible ABO transfusions are a latent risk in the use of group O platelet concentrates, so the titration of anti-A/B hemolysins is one of the strategies for its prevention. The objective of this study was to determine the frequency of hemolysins titers IgG and IgM anti-A/B isotypes in blood donours. It was a simple randomized descriptive cross-sectional study with a sample size of 308 samples. The methodology was applied in tube, saline gel and anti-IgG anti-immunoglobulin and by means of serial solutions the title was verified. Additionally, a survey was conducted on the possible risk factors for the increase in securities. Descriptive statistics were used through the application of the SPSS version 22.0 software and the relationship between independent variables through the Chi-square statistical analysis and the kappa index was applied to match the visual readings of the gel cards. The existence of IgG and IgM anti-A/B isotype hemolysins of titers greater than 1/64 was determined. There was a statistically significant relationship between pregnancies and anti-A/B IgG titres>1/128; and the increase in IgM isotype hemolysins and probiotic intake. The results demonstrate the need to implement hemolysin titration prior to transfusion of non-isogroup platelet concentrates, so a risk-benefit investigation and follow-up of patients with transfusions of ABO incompatible platelet concentrates is recommended.

Os possíveis efeitos adversos que ocorrem em transfusões incompatíveis ABO são um risco latente no uso de concentrados de plaquetas do grupo O, portanto a titulação de hemolisinas anti-A/B é uma das estratégias para sua prevenção. O objetivo deste estudo foi determinar a frequência de títulos de hemolisinas de isotipos IgG e IgM anti-A/B em doadores de sangue. Trata-se de um estudo descritivo transversal aleatório simples, com tamanho de amostra de 308 amostras. A metodologia foi aplicada em tubo, gel salino e anti-imunoglobulina IgG e utilizando soluções em série, o título foi verificado. Além disso, foi realizada uma pesquisa sobre os possíveis fatores de risco para o aumento destes títulos. A estatística descritiva foi utilizada através da aplicação do software informático SPSS versão 22.0 e a relação entre variáveis independentes por meio da análise estatística do qui-quadrado e, para estabelecer a concordância com as leituras visuais dos cartões de gel, o índice kappa foi aplicado. Foi determinada a existência de hemolisinas de isotipo IgG e IgM anti-A/B de títulos maiores que 1/64. Existiu uma relação estatisticamente significante entre gestações e títulos de IgG anti-A/B>1/128; e o aumento de hemolisinas do isotipo IgM e a ingestão de probióticos. Os resultados demonstram a necessidade de implementar a titulação da hemolisina antes da transfusão de concentrados de plaquetas não isogrupo, por isso, recomenda-se uma investigação de risco-benefício e acompanhamento de pacientes com transfusões de concentrados de plaquetas incompatíveis com ABO.

Sistema Rh-Hr y variantes del antígeno D en tres poblaciones afroecuatorianas del Valle del Chota / Rh-Hr system and D antigen variants in three Afro-Ecuadorian populations in the Chota Valley / Sistema Rh-Hr e variantes do antígeno D em três populações afro-equatorianas no vale do Chota

Resumen La identificación inequívoca del antígeno D en medicina transfusional es de vital importancia para evitar reacciones postransfusionales y la enfermedad hemolítica del recién nacido. Es común el uso de reactivos serológicos monoclonales o tarjetas de gel y su interpretación está definida por cruces, de acuerdo con la reacción serológica. El propósito de este estudio fue determinar la frecuencia del factor Rh y las variantes del antígeno D en una población afroecuatoriana. Se trató de un estudio descriptivo, transversal con muestreo aleatorio simple de 541 pobladores. Para la tipificación del factor Rh se utilizó la metodología en tubo con antisueros monoclonales y para la detección de las variantes de D se utilizaron tarjetas de gel IDCoombs Anti-IgG. Las lecturas se verificaron mediante el análisis del índice kappa. Se aplicó estadística descriptiva y el análisis de Chi cuadrado para establecer la relación de las variables y su significación. Se identificó una frecuencia del 92% de individuos Rh(D) positivo y un 8% Rh(D) negativo. El 4,80% de los individuos presentaban la variante D débil y el 79% reacciones serológicas entre 2 y 3(+) indicativas de otras variantes del antígeno D. El fenotipo más común fue el R0/R0. Estos datos demuestran la necesidad de confirmar la existencia de variantes del antígeno D en esta población para un mejor manejo de la sangre. Una limitante constituye la disponibilidad de técnicas moleculares para la genotipificación de D; sin embargo, se podría implementar la fenotipificación RHCE como estrategia pretransfusional.

Abstract The unequivocal identification of D antigen in transfusion medicine is of vital importance to avoid post-transfusion reactions and hemolytic disease of the newborn. The use of monoclonal serological reagents or gel cards is common and their interpretation is defined according to the serological reaction by crosses. The purpose of this study was to determine the frequency of Rh factor and D antigen variants in the Afro-Ecuadorian population. This was a descriptive, cross-sectional study with simple random sampling of 541 residents. Tube typing with monoclonal antisera was used to typify Rh factor and ID-Coombs Anti-IgG gel cards were used to detect D variants, and the readings were verified by analysis of the kappa index. Descriptive statistics and Chi-square analysis were applied for the relationship of the variables and their significance. A frequency of 92% of Rh(D) positive individuals and 8% Rh(D) negative individuals were identified. Almost 5% (4.80%) of the individuals presented the weak D variant and 79% serological reactions between 2-3(+) indicative of other D antigen variants, the most common phenotype being R0/R0. These data demonstrate the need to confirm the existence of D antigen variants in this population for better management and availability of blood. A limitation is the availability of molecular techniques for D genotyping, however, RHCE phenotyping could be implemented as a pretransfusion strategy.

Resumo A identificação inequívoca do antígeno D na medicina transfusional é de vital importância para evitar reações pós-transfusionais e a doença hemolítica do recém-nascido. É comum o uso de reagentes sorológicos monoclonais ou cartões de gel e sua interpretação é definida por cruzamentos de acordo com a reação sorológica. O objetivo deste estudo foi determinar a frequência do fator Rh e as variantes do antígeno D numa população afro-equatoriana. Foi um estudo descritivo, transversal, com amostragem aleatória simples de 541 residentes. Para a tipagem do fator Rh foi utilizada a metodologia em tubo com anti-soros monoclonais e para a detecção das variantes de D, os cartões de gel ID-Coombs Anti-IgG. As leituras foram verificadas por análise do índice kappa. Foi aplicada estatística descritiva e para estabelecer a relação das variáveis e sua significação se utilizou a análise do qui-quadrado. Identificando uma frequência de 92% dos indivíduos Rh (D) positivos e 8% Rh (D) negativos. 4,80% dos indivíduos apresentavam a variante D fraca e 79% reações sorológicas entre 2 e 3(+) indicativas de outras variantes do antígeno D, sendo o fenótipo mais comum o R0/R0. Esses dados demonstram a necessidade de confirmar a existência de variantes do antígeno D nessa população para melhor gerenciamento e disponibilidade de sangue. Uma limitação é a disponibilidade de técnicas moleculares para a genotipagem de D, no entanto, a fenotipagem de RHCE poderia ser implementada como uma estratégia de pré-transfusão.

Prevalencia del antígeno D débil y su clasificación fenotípica en donantes voluntarios de sangre / Prevalence of "weak" D antigen and its phenotypic classification in voluntary blood donours / Prevalência do antígeno D "fraco" e sua classificação fenotípica em doadores voluntários de sangue

En el campo de la medicina transfusional la correcta identificación de los fenotipos del sistema Rh y en especial del antígeno D debe ser de manera inequívoca por su relevancia clínica. El antígeno D tiene variantes denominadas D parcial, D débil y DEL, las que se producen por mutaciones de los alelos RHD/RHCE o por una supresión en la expresión fenotípica. Se trató de un estudio descriptivo, retrospectivo de corte transversal en el que se realizó una revisión de registros primarios durante el período 2011-2014 validados de acuerdo con el protocolo de Hernández-Sampieri R. Se utilizó estadística descriptiva mediante la aplicación del software informático SPSS versión 22.0 y se estableció la relación entre variables independientes a través del análisis estadístico de Chi-cuadrado. Se determinó una prevalencia de donantes RhD negativos de 1,8 a 2,5% y RhD débil de 1,79 a 2,28%. La fenotipificación serológica permitió identificar que los tipos 2 y 5 eran los más frecuentes. También se estableció la existencia de aloinmunización por anti-D, anti-C y anti-E. Se estableció de esta manera la existencia de D débil y una importante aloinmunización en la población de donantes de sangre tipificados como D negativo y D débil, por lo que se recomienda implementar un algoritmo de identificación del antígeno D en servicios de medicina transfusional.

In the field of transfusion medicine, the correct identification of the phenotypes of the Rh system and especially of the D antigen must be unequivocal for clinical relevance. The D antigen has variants called partial D, weak D and DEL. These are produced by mutations of the RHD/RHCE alleles or a suppression in phenotypic expression. The objective of this study was to establish the frequency of weak D antigen in the population of blood donours from 17 Ecuadorian states and their phenotypic combinations. It was a descriptive, retrospective cross-sectional study performed during the 2011-2014 period and validated with primary records in accordance with the Hernández-Sampieri R protocol. A descriptive statistics through the application of SPSS computer software version 22.0 was used and the relationship between independent variables through the Chi-square statistic method was established. A prevalence of RhD negative donours from 1.8 to 2.5% and weak D 1.79 to 2.28% was observed The serological phenotyping made it possible to identify that type 2 and 5 were the most frequent. The presence of alloimmunization by anti-D, anti-C and anti-E was also established. Besides, the presence of weak D types and significant alloimmunization in the donour population of blood typed as D negative and weak was established, so it is recommended to implement an algorithm for the identification of D antigen in transfusional medicine services.

No campo da medicina transfusional, a correta identificação dos fenótipos do sistema Rh e especialmente do antígeno D deve ser inequívoca devido a sua relevância clínica. O antígeno D tem variantes chamadas de D parcial, D fraca e DEL, as quais são produzidos por mutações dos alelos RHD/RHCE ou por uma supressão na expressão fenotípica. O objetivo deste estudo foi estabelecer a frequência do antígeno D fraco em uma população de doadores de sangue de 17 províncias equatorianas e suas combinações fenotípicas. Foi uma estudo descritivo, retrospectivo de corte transversal em que se realizou uma revisão dos registros primários validados de acordo com o Protocolo Hernández-Sampieri R durante o período 2011-2014. Utilizou-se estatísticas descritivas através da aplicação do software informático SPSS versão 22.0 e a relação entre variáveis independentes através da análise estatística de qui-quadrado. Foi determinada uma prevalência de doadores RhD negativos de 1,8 a 2,5% e RhD fraco de 1,79 a 2,28%. A genotipagem serológica permitiu identificar que os tipos 2 e 5 são os mais frequente. A existência de alo imunização por anti-D, anti-C e anti-E também foi estabelecida. A existência de D fraco e uma alo imunização significativa na população de doadores de sangue tipificados como D negativo e fraco, por isso é recomendado implementar um algoritmo de identificação do antígeno D em serviços de medicina transfusional.

Prevalencia de anticuerpos anti-eritrocitarios en donantes voluntarios de sangre Ecuatorianos / Prevalence of anti-erythrocyte antibodies in Ecuadorian voluntary blood donors / Prevalência de anticorpos anti-eritrocitários em doadores de sangue voluntários equatorianos

El rastreo de anticuerpos anti-eritrocitarios es una de las pruebas pretransfusionales más importantes en medicina transfusional por su aporte en la prevención de reacciones adversas luego de la administración de hemocomponentes. Sin embargo, no todos los bancos de sangre ecuatorianos han incluido esta prueba en sus protocolos de trabajo. Para demostrar su importancia se realizó el presente estudio cuyo propósito fue alertar al sistema nacional de salud sobre la existencia de aloinmunización en la población de donantes de sangre. Se estableció una prevalencia de anticuerpos anti-eritrocitarios del 0,27% y se identificó una mayor frecuencia en el género femenino. Los anticuerpos identificados estuvieron relacionados con los sistemas eritrocitarios Rh (RH), Kell (KEL), Duffy (FY) y Kidd (JK). Una de las limitaciones para la inclusión de esta prueba en los bancos de sangre y servicios de medicina transfusional es el elevado costo de los reactivos y la falta de paneles de células eritrocitarias de composición homocigota y heterocigota para la identificación de anticuerpos anti-eritrocitarios nativos, situación que constituye una oportunidad para que el Ministerio de Salud Pública del Ecuador promueva mejores estrategias para la importación de reactivos, reducción de costos y disponibilidad de paneles de células.

The screening of anti-erythrocyte antibodies is one of the most important pretransfusion tests in transfusion medicine because of its contribution to the prevention of adverse reactions after the administration of blood components, however not all blood banks in Ecuador have included this test in their work protocols. This study has the purpose to alert the national health system about the existence of alloimmunization in the blood donour population. A prevalence of anti-erythrocyte antibodies of 0.27% was established, with a higher frequency being found in the female gender. The identified antibodies are related to the erythrocyte systems Rh (RH), Kell (KEL), Duffy (FY) and Kidd (JK). One of the limitations for the inclusion of this test in blood banks and transfusion medicine services is the excessive cost of serological and gel methodology reagents, and the lack of homozygous and heterozygous erythrocyte cell panels for the identification of native anti-erythrocyte antibodies. That situation constitutes an opportunity for the Ministry of Public Health of Ecuador to promote better strategies for the imports of reagents, cost reduction and availability in the country.

O rastreamento de anticorpos anti-eritrocitários é um dos testes pré-transfusão mais importantes na medicina transfusional pela sua contribuição na prevenção de reações adversas após a administração de componentes sanguíneos. No entanto, nem todos os bancos de sangue do Equador tem incluído esse teste em seus protocolos de trabalho. Para demonstrar a sua importância, foi realizado o presente estudo que teve como objetivo alertar o sistema nacional de saúde sobre a existência de aloimunização na população de doadores de sangue. Foi estabelecida uma prevalência de anticorpos anti-eritrocitários de 0,27%, identificando maior frequência no sexo feminino. Os anticorpos identificados estiveram relacionados com os sistemas eritrocitários Rh (RH), Kell (KEL), Duffy (FY) e Kidd (JK). Uma das limitações para a inclusão destes testes em bancos de sangue e serviços de medicina da transfusão é o alto custo dos reagentes, além da falta de painéis de células eritrocitárias de composição homozigótica e heterozigótica para a identificação de anticorpos anti-eritrocitários nativos, situação que constitui uma oportunidade para que o Ministério da Saúde Pública do Equador promova melhores estratégias para a importação de reagentes, redução de custos e disponibilidade de painéis de células.

Tipificación del antígeno Duffy como método indirecto para identificar individuos asintomáticos de malaria / Duffy antigen typing as an indirect method to identify asymptomatic malaria individuals

En países considerados endémicos de malaria a pesar de las estrategias realizadas anualmente para el control y erradicación de esta enfermedad existen brotes aislados de malaria debido probablemente a portadores asintomáticos, presencia de individuos con fenotipo Duffy negativo o movimientos poblacionales. El sector "50 casas" de la provincia de Esmeraldas-Ecuador reúne todas estas características por lo que el objetivo de esta investigación fue determinar la presencia del fenotipo Fy(a-b-) y su relación con el Plasmodium vivax. Se realizó una encuesta a cada miembro de las familias participantes y luego de aceptado y firmado el consentimiento informado se tomaron muestras sanguíneas para la realización de pruebas serológicas en búsqueda de anticuerpos y antígenos de P. vivax, fenotipificación del sistema Duffy y pruebas de PCR en tiempo real para la determinación de ADN de Plasmodium vivax y P. falciparum. Los resultados demostraron que existe una asociación estadísticamente significativa entre el fenotipo Duffy y malaria por P. vivax (p<0,05). Ante esta situación los organismos de control deberán proponer nuevas estrategias para la detección de portadores asintomáticos y medidas preventivas para evitar nuevos brotes de malaria, así como determinar si P. vivax ha encontrado un nuevo mecanismo de invasión en individuos portadores del fenotipo Fy(a-b-).

Despite the strategies carried out annually for the control and eradication in countries considered endemic for malaria, there are isolated outbreaks probably due to asymptomatic carriers. These involve the presence of individuals with Duffy negative phenotype or population movements. The neighbourhood "50 casas" of the province of Esmeraldas-Ecuador has all these characteristics, so the purpose of this research was to determine the presence of the Fy(a-b-) phenotype and its relationship with the Plasmodium vivax. A survey was carried out into each member of the participating families and after accepting and signing the informed consent, blood samples were taken to perform serological tests in search of antibodies and antigens of P. vivax. The phenotyping of Duffy system and real-time PCR tests for DNA determination of Plasmodium vivax and falciparum was realized. The results showed that there is a statistically significant association between the Duffy phenotype and P. vivax malaria (p<0.05). In view of this situation, the control agencies should propose new strategies for the detection of asymptomatic carriers and preventive measures to hinder new outbreaks of malaria and determine if P. vivax has found a new invasion mechanism in individuals with the Fy(a-b-) phenotype.

Nos países considerados endêmicos para malária, apesar das estratégias realizadas anualmente para o controle e erradicação desta doença existem surtos isolados de malária, resultantes provavelmente de portadores assintomáticos, presença de indivíduos com fenótipo Duffy negativo ou movimentos populacionais. O setor "50 casas" na província de Esmeraldas-Equador reúne todas essas características. Portanto o objetivo desta pesquisa foi determinar a presença de fenótipo Fy(a-b-) e sua relação com Plasmodium vivax. Foi realizada uma enquete para cada membro das famílias participantes e após a aceitação e assinatura do Consentimento informado, foram coletadas amostras de sangue para a realização de testes sorológicos em busca de anticorpos e antígenos do P. vivax. Além de testes de fenotipagem do sistema Duffy e PCR em tempo real para determinação de DNA de Plasmodium vivax e P. falciparum. Os resultados mostraram que existe uma associação estatisticamente significante entre o fenótipo Duffy e a malária por P. vivax (p<0,05). Perante está situação os órgãos de fiscalização terão que propor novas estratégias para a detecção de portadores assintomáticos e medidas preventivas para evitar novos surtos de medidas de malária bem como determinar se P. vivax tem encontrado um novo mecanismo de invasão em indivíduos portadores do fenótipo Fy(a-b-).

Frecuencia de fenotipos del sistema Rh en donantes voluntarios de sangre / Frequency of Rh system phenotypes in voluntary blood donors / Frequência de fenótipos do sistema Rh em doadores de sangue voluntários

El sistema Rh es altamente polimórfico y está relacionado con la producción de aloanticuerpos y la enfermedad hemolítica del recién nacido. Los antígenos codificados por los genes RHD y RHCE forman el fenotipo Rh que es característico en cada población. Las variantes RHCE no han sido identificadas en la población ecuatoriana y así constituyen un riesgo de aloinmunización durante el embarazo o en transfusiones de componentes sanguíneos incompatibles. Prueba de ello es el estudio realizado en Ecuador que determinó una aloinmunización del 0,27%. Los anticuerpos con mayor frecuencia pertenecían al sistema Rh, resultados que motivaron la realización del presente estudio. Se analizaron un total de 1.298 muestras de donantes de sangre provenientes de 22 provincias ecuatorianas. Para la fenotipificación se utilizaron antisueros comerciales de la casa BIORAD y células de fenotipo conocido para el control de calidad interno, y se identificaron 20 fenotipos del sistema Rh distribuidos de forma heterogénea en las 22 provincias; el más frecuente fue Rz/R0. En donantes con fenotipo D débil el más común fue el R2/r, mientras que en los donantes Rh(D) negativo fue el fenotipo r/r. Estos datos demuestran la variedad de fenotipos en la población ecuatoriana y por ende la necesidad de su detección oportuna.

The Rh system is highly polymorphic. It is related to the production of alloantibodies and the hemolytic disease of the newborn. The antigens encoded by the RHD and RHCE genes form the Rh that is characteristic for each population. The RHCE variants have not been identified in the Ecuadorian population, constituting a risk of alloimmunization during pregnancy or in transfusions of incompatible blood components. Proof of this is the study carried out in Ecuador that determined an alloimmunization of 0.27% and the antibodies, more frequently belonged to the Rh system, results that motivated the realization of the present study. A total of 1298 samples from blood donors from 22 Ecuadorian provinces were analyzed. For the phenotyping, commercial antisera from the BIORAD house were used and cells of known phenotype for internal quality control. Identifying 20 phenotypes of the Rh system distributed heterogeneously in the 22 provinces, the most frequent was Rz/R0. In donors with weak D phenotype the most common was R2/r; whereas in Rh(D) negative donors was the r/r phenotype, these data demonstrate the variety of phenotypes in the Ecuadorian population and therefore the need for their timely detection.

O sistema Rh é altamente polimórfico e está relacionado com a produção de aloanticorpos e a doença hemolítica do recém-nascido. Os antígenos codificados pelos genes RHD e RHCE formam o fenótipo de Rh, que é característico para cada população. As variantes de RHCE não foram identificados na população equatoriana constituindo um risco de aloimunização durante a gravidez ou em transfusões de componentes sanguíneos incompatíveis. Prova disso é o estudo realizado no Equador que determinou aloimunização de 0,27%. Os anticorpos com maior frequência pertenciam ao sistema Rh, resultados que motivaram a realização do presente estudo. Um total de 1298 amostras de doadores de sangue de 22 estados equatorianos foram analisadas. Utilizou-se para a fenotipificação anti-soros comerciais BIORAD e células de fenótipo conhecido para controle de qualidade interno, identificando-se 20 fenótipos do sistema Rh heterogeneamente distribuídos nos 22 estados. O mais frequente foi Rz/R0. Em doadores com fenótipo D fraco, o mais comum foi o R2/r; ao passo que nos doadores Rh (D) negativo foi o fenótipo r/r. Esses dados demonstram a variedade de fenótipos na população do Equador, e portanto a necessidade da detecção precoce dos mesmos.